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兒童乳牙牙髓干細胞順硬度基質(zhì)表面延展和向牙本質(zhì)分化的潛能

李章一; 劉鳳婷; 黃建永; 蘇小營; 王志興; 鄭全; 李艷霞; 劉曉智 天津市第五中心醫(yī)院口腔科; 天津市300450; 天津醫(yī)科大學; 天津市300070; 北京大學力學與工程科學系; 北京市100871; 天津市口腔醫(yī)院兒童口腔科; 天津市300041; 天津市第五中心醫(yī)院中心實驗室; 天津市300450

關(guān)鍵詞:牙髓干細胞 牙本質(zhì) 細胞遷移 細胞分化 牙本質(zhì)基質(zhì)蛋白1 

摘要:背景:牙髓干細胞在適宜誘導條件下能夠向牙本質(zhì)分化,是牙齒組織工程的重要種子細胞。然而,以往所使用的誘導劑多為化學制劑,不利于體內(nèi)應(yīng)用。近來有報道稱間充質(zhì)干細胞能夠順材質(zhì)硬度分化,這種由物理特性誘導的細胞分化研究報道較少。目的:觀察人源性乳牙牙髓干細胞在硬介質(zhì)表面的延展特點及向牙本質(zhì)分化潛能,為牙組織工程提供參考。方法:原代分離培養(yǎng)和鑒定兒童自然脫落的乳牙牙髓干細胞;使用低熔點瓊脂糖配制彈性模量為(9.12±0.94),(27.18±3.55),(59.37±4.05)和(86.45±5.33)k Pa4個梯度的固體凝膠基質(zhì),二維克隆形成實驗和劃痕實驗檢測第4代乳牙牙髓干細胞在上述硬基質(zhì)表面的延展能力,Western blot方法檢測牙本質(zhì)基質(zhì)蛋白1、牙本質(zhì)磷蛋白、牙本質(zhì)涎蛋白的表達。結(jié)果與結(jié)論:當人乳牙牙髓干細胞接種于極低和低等硬度凝膠介質(zhì)表面時,乳牙牙髓干細胞幾乎均以邊緣整齊的細胞克隆存在,很少見細胞平鋪和延展現(xiàn)象;但是當將其接種于中等和高等硬度凝膠介質(zhì)表面時,乳牙牙髓干細胞克隆邊緣則表現(xiàn)出明顯的平鋪和延展,表現(xiàn)為細胞胞體變大,細胞邊緣外伸明顯。相似的現(xiàn)象也經(jīng)細胞劃痕實驗所驗證。人源性乳牙牙髓干細胞在中等和高等彈性模量介質(zhì)表面培養(yǎng)時,表達較高水平的牙本質(zhì)基質(zhì)蛋白1、牙本質(zhì)磷蛋白、牙本質(zhì)涎蛋白。結(jié)果表明,人源性乳牙牙髓干細胞隨著培養(yǎng)基質(zhì)硬度的增加其延展性及成牙本質(zhì)分化能力逐漸增強,為未來牙組織工程提供方法借鑒。

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