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歸腎丸水提物干預(yù)SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞增殖及PI3K、AKT蛋白的表達

劉燕; 關(guān)永格; 宋陽 廣州中醫(yī)藥大學; 廣東省廣州市510405; 廣州中醫(yī)藥大學第三附屬醫(yī)院; 廣東省廣州市510360

關(guān)鍵詞:骨髓間充質(zhì)干細胞 歸腎丸 細胞增殖 pi3k akt 

摘要:背景:補腎類方劑對骨髓間充質(zhì)干細胞的促增殖作用已經(jīng)被證實,但其作用機制尚不明確,該研究以歸腎丸為例,探討其可能的作用機制。目的:通過觀察歸腎丸水提物對骨髓間充質(zhì)干細胞增殖的影響,探究歸腎丸滋補腎精與骨髓間充質(zhì)干細胞增殖之間的關(guān)系。方法:從3周齡雄性SD大鼠股骨骨髓中分離提取骨髓間充質(zhì)干細胞,采用全骨髓貼壁法將其純化,選用純度較高的第3代細胞進行藥物干預(yù),將其分為空白對照組和10,20,40,80,100 mg/L歸腎丸水提物組,在體外連續(xù)培養(yǎng)5 d以觀察量效關(guān)系和時效關(guān)系。倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài),CCK-8法評估細胞增殖活性,Western blot檢測細胞中PI3K、AKT蛋白表達。結(jié)果與結(jié)論:①歸腎丸水提物組的細胞增殖能力明顯高于空白對照組,存在一定的量效和時效關(guān)系,尤以80 mg/L歸腎丸水提物干預(yù)3 d時作用效果最佳;②歸腎丸水提物組骨髓間充質(zhì)干細胞中PI3K、AKT蛋白的表達明顯高于空白對照組;③結(jié)果提示,歸腎丸水提物能有效促進骨髓間充質(zhì)干細胞的增殖,可能與其參與調(diào)控PI3K/AKT信號通路有關(guān)。

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